产品货号：
RFT609
中文名称：
超高分子量非变性电泳蛋白Marker(21-1000kD)
英文名称：
Ultra-High MW Native-PAGE Protein Marker(21kDa～1MDa)
产品规格：
20T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
条带说明：
基本信息：
产品组成：
保存：-20℃，有效期1年。
注意事项：
使用方法：
试验示例：
相关搜索：超高分子量非变性电泳蛋白Marker(21-1000kD)，非变性蛋白Marker
本蛋白Marker由6种蛋白组成，分子量范围为21～1000kD，经过电泳后，用考马斯亮蓝染色后可以得到8条主带，本制品为非变性电泳Marker，不适用于变性电泳。
条带说明：
| 蛋白名称 | 分子量(kD) | 蛋白来源 | pI | 说明 |
| PR1 | ~1000 | equine | N/A | 非变性下约1000kD。 |
| Ferritin | ~440~880 | equine spleen | N/A | 非变性下440kD、880kD。 |
| RC2 | ~200 | 重组蛋白 | 6.7 | 单体蛋白分子量为75kD，在Tris-甘氨酸非变性下表现为分子量~200kD。 |
| RC1 | ~66~132 | 重组蛋白 | 4.7 | 单体蛋白分子量为~66kD，在Tris-甘氨酸非变性下表现为单体(~66kD)和二聚体(~132kD)。 |
| Ovalbumin | ~45 | egg white | 5.2 | 球蛋白，分子量为45kD，非变性条件下大于45kD会出现电荷异构体(分子量~50kD)。 |
| Trypsin Inhibitor | ~21 | Soybean | 4.5 | 非变性下分子量~21kD。 |
基本信息：
| 主条带数量 | 8条 |
| 贮存缓冲液 | 50mM Tris(pH7.5)，15%甘油，溴酚蓝等。 |
| 浓度 | 0.2～0.4μg/μL |
| 上样前处理 | 融化混匀直接上样，不要加热处理。 |
| 推荐凝胶体系 | 4%～15% Tris-甘氨酸非变性凝胶；3%～12%或4%～16% Blue Native凝胶。 |
| 推荐上样体积 | 5μL(1mm厚度10齿梳子) |
| 推荐染色方法 | 非预染Marker，电泳时不可见条带，电泳后需要考马斯亮蓝染色可以观察条带。 |
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| 超高分子量非变性电泳蛋白Marker(21～1000kD) | 100μL |
| 说明书 | 1份 |
保存：-20℃，有效期1年。
注意事项：
- 本制品仅适用于酸性蛋白非变性电泳，不适用于变性电泳和碱性蛋白非变性电泳。非变性蛋白电泳条件下，不能精确判断蛋白的分子量大小，更多是作为相对参照。因为在非变性条件下，蛋白的电荷，空间结构，物化性质等都对蛋白的迁移有影响，所以非变性电泳的蛋白分子量需谨慎解读并结合其他方法（如SEC-HPLC）验证。
- 非变性蛋白电泳Marker由于要保持蛋白的天然结构，都没有偶联染料，在电泳时基本都看不到条带；但是本Marker中的440kD由于天然蛋白中含有铁离子，使得电泳后在胶上可见淡黄色，凝胶转膜后，膜上也可以看到黄色的440kDa条带，可以大体判断Marker转膜的效果。
- 有两种方法可以解决非变性Marker转膜后条带显示问题，第一种是凝胶转膜后丽春红染色液染膜，可以看到Marker条带，顺便可以检测转膜效率，然而要注意的是丽春红染色灵敏度比较低，可能不能完全看到完整的Marker条带。第二种方法是电泳结束后，把含有Marker泳道的凝胶切下，单独用考马斯亮蓝染色液染色，剩余的凝胶去完成转膜到ECL发光检测过程，最后的发光结果和Marker染色结果拼接判断条带范围。
- 推荐使用4～15%的非变性PAGE胶（货号：RFT392）或者3～12%和4～16% Native BN/CN预制胶（货号：RFT462或RFT463）。其他浓度凝胶并非不适用，然而条带迁移位置可能会有变化，因为非变性蛋白Marker迁移率不仅受分子量影响，还受诸多因素和凝胶体系的影响。如：132kD和200kD条带在10% Tris-甘氨酸非变性胶中几乎重叠，不能有效分离（实验示例3），而在4%～15% Tris-甘氨酸非变性中可以有效分离（实验示例1）。
使用方法：
- 取出产品后，常温融化，彻底混匀，上样电泳。上样量根据胶的厚度和梳子的宽度来确定。一般说来，1mm厚度10齿梳子加样孔上样5μL，1mm厚度15齿梳子加样孔上样量2.5μL，其他规格梳子请适当调整上样量。
- 本制品不含蛋白凝胶制备试剂，您可以选择非变性PAGE凝胶制备及电泳试剂盒（货号：RFT219或RFT392）。如自备试剂，经典Tris-甘氨酸系统中把制胶溶液、电泳缓冲液和上样缓冲液中的SDS和还原剂（DTT或β-巯基乙醇）全部去除即可进行非变性电泳。
- 电泳条件：建议使用4～15%非变性梯度胶进行电泳。
恒电压 120V 起始电流 27～35mA 结束电流 7～10mA 电泳时间 50～60min 恒压电泳，电流无法调节，会逐渐降低。 - 电泳结束后，考马斯亮蓝染色，观察结果。使用银染染色时，由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法，需要适当降低Marker上样量，一般稀释20～50倍后上样。
试验示例：
- Tris-甘氨酸非变性(4%～15%)
电泳条件：1×TG，200V，50-19mA，47min。
染色：QuickLan蛋白染色液，20min。 - Blue-Native电泳(4～16%)：
电泳条件：1×蓝色缓冲液，150V，7.5～1.5mA，65min。
更换为1×无色缓冲液，300V，30min。
染色：QuickLan蛋白染色液，20min。 - Tris-甘氨酸非变性胶(10%)：
相关搜索：超高分子量非变性电泳蛋白Marker(21-1000kD)，非变性蛋白Marker